人類紅細胞ABO血型、HAB分泌型和MN血型基因分型及基因多 ...

節點文獻. 人類紅細胞ABO血型、HAB分泌型和MN血型基因分型及基因多態性研究. Genotyping and gene polymorphism of human ABO blood group,HAB secretor status and MN ... CNKI主頁|下載閱讀器| 登錄 中國優秀碩士學文論文全文數據庫 節點文獻 人類紅細胞ABO血型、HAB分泌型和MN血型基因分型及基因多態性研究 GenotypingandgenepolymorphismofhumanABObloodgroup,HABsecretorstatusandMNbloodgroup 分頁CAJ下載 分章PDF下載 整本CAJ下載 整本PDF下載 在線閱讀 不支持迅雷等下載工具。

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【作者】 孟慶寶； 【導師】 蘭炯采； 【作者基本信息】 第一軍醫大學， 血液免疫學， 2001， 碩士 【摘要】目的：采用聚合酶鏈反應-序列特異性引物擴增（PCR-SSP）基因定型方法，對ABO血型、HAB分泌型和MN血型系統基因定型，研究ABO血型、HAB分泌型和MN血型基因多態性分布特征及ABO血型基因定型在臨床輸血、遺傳分析中的應用。

方法：采用快速鹽析法提取外周血標本中的DNA或用經典的酚-氯仿法提取羊水標本中的DNA。

設計序列特異性寡核苷酸引物，采用PCR-SSP擴增ABO血型、HAB分泌型和MN血型基因。

結果：采用7對引物，對已知ABO基因型的DNA標本進行基因定型，證實本文的ABO基因定型方法可靠；對104例健康、無血源關系的漢族個體ABO血型基因定型，結果與血清學所定表型完全符合，ABO血型基因頻率分別為A~1：0.1538，A~2：0.0962，B：0.2452，O~1：0.5048，O~2未檢到（X~2=6.7323，P＞0.25，符合Hardy-Weinberg公式）。

3例臨床上用血型血清學方法難以定型的標本，采用本文的基因分型技術分別定為BO~1、A~2O~1和A~2O~1型。

2例因白血病化療引起的血型抗原減弱的病人分別鑒定為BO~1、A~1B。

1案例，用ABO表型、Rh表型、MN表型和HLA-A、B、DR、DQ基因型不排除親子關系，但用ABO基因型排除了親子關系。

1例產前胎兒血型鑒定，用羊水標本基因型定為A~2B。

血清學報道的3例亞型Bx、AB2、A2B，基因型分別為O~1O~1、A~2O~1、BO~1，可以認為血清學亞型報道有誤。

用3對引物，對104例健康、無血源關系的漢族個體HAB分泌型基因分型，基因頻率分別為分泌基因Se：0.9808，非分泌基因se：0.0192（X~2=0.0421，P＞0.75，符合Hardy-Weinberg公式），但與報道的血型血清學分型結果相比非分泌基因se的頻率顯著偏低，于是選擇4例血清學已定為非分泌型的個體用本文的基因定型方法鑒定，基因型均為Se/Se。

用2對特異性引物擴增MN血型基因，103例隨機供血者個體的基因型和血清學表型符合，M、N基因頻率分別為0.4806和0.5194。

結論：PCR-SSP用于ABO血型和MN血型基因定型方便、可靠，獲得了部分漢族人群ABO血型、HAB分泌型和部分供血者MN血型的基因多態性資料，并用ABO基因分型技術解決臨床輸血前血型鑒定、產前胎兒血型鑒定、親權鑒定和血清學亞型的個確性驗證。

同時本文的HAB分泌型基因分型結果間接提示在我國漢族人群中G447A和G757A突變不能完全代表非分泌基因sc。

更多還原 【Abstract】Aim:Tosetupthemethodsofpolymerasechainreaction-sequencespecificprimers(PCR-SSP)forhumanABObloodgroup,HABsecretorstatusandMNbloodgroupgenotypingandstudythepolymorphismofABObloodgroupgenes,HABsecretorstatusgenesinpartofHanpopulationinChineseandMNbloodgroupgenesinrandomblooddonorsandstudytheapplicationofABOgenotypinginclinicaltransfusionandgenetics.Methods:thesampleDNAwasextractedfromperiodicalbloodbyrapid-salt-methodorbytraditionalphenol-chloroformmethodfromamnioticfluid,andthePCR-SSPbasedmethodswereintroducedtodesignatethegenotypesofABObloodgroup,HABsecretorstatusandMNbloodgroup.Results:SevenselectedDNAsamplespreviouslyknowngenotypesweredetected,provingthereliabilityofthegenotypingforABObloodgroup.ABOgenesfrequenciesof104healthyandunrelatedHanindividualswere0.1538forA?0.0962forA2,0.2452forB,0.5048for0?andO2wasnotfound(X2=6.7323,P>0.25,thedatafitHardy-Weinbergdistribution),havingconcordancewiththeserologicalresult.ThreepatientswithunclearABQbloodgroupbytheroutineserologicalmethod,werereadilydetectedbyourgenotypingmethodasB0?A20?andA20?respectively.TwocasesofantigenslowexpressioncausedbyleukemiachemotherapyweredesignatedasB0抋ndA態.Acaseofdisputedpaternity,whichwasnotexclusivebyABO,MN.RhandHLA-A,B,DR,DQsystems,provedtobenopaternitybyABOgenotyping.AnamnioticfluidspecimenfromantepartumdiagnosiswasdetectedasA2B.ThreereportedABOsubgroupBx,AB2,andA2Bbyserologicalmethod,weredesignatedas0A20?andB0?respectivelybygenotyping.ThefrequenciesofHABsecretorgene(Se)andnon-secretorgene(se)were0.9808and0.0192respectivelybythreepairsofspecificprimers(X2~Z0.042l,>0.75,thedatafitHardy-Weinbergdistribution).Comparedwiththereportedserologicalresults,thefrequencyofseinthisstudyis3ignificantlydecreased.Thusweselectedfourindividualspreviouslydetectedasnon-secretorphenotypesbyserologicalmethodtobedetectedbythisgenotypingmethod,andallweredesignatedasSe/Se,whichsuggeststhatothermutationsmayexistinthesesamples.Comparedwiththeserologicalmethod,PCR-SSPforMNbloodgrouphasconcordancewiththeserologicalphenotypes.ThefrequencyofMandNin103Chinesedonorsis0.4806and0.5194respectively~whichhasnotstatisticallysignificantdeviationfromHardy-Weinbergequilibrium.Conclusion:TheresultsdemonstratethatPCR-SSPusedinthisstudy.isaconvenientandreliablemethodforABOandMNgenotyping,andshouldbeofgreatvalueinclinicalandforensicapplication.WealsodeducethatthemutationofG447AandG757AcannotcoverallthesegenesinChineseHanpopulation.更多還原 【關鍵詞】ABO血型； HAB分泌型； 基因分型； 基因多態性； 聚合酶鏈反應－序列特異性引物擴增（PCR-SSP）； 【Keywords】ABObloodgroup； ABHsecretorstatus； MNbloodgroupgenefrequency； PCR-SSP； genotyping； polymorphism； 【網絡出版投稿人】第一軍醫大學 【網絡出版年期】2002年 01期 【分類號】R457.11;R550.2 【下載頻次】410 打印本頁 節點文獻中：  京ICP證040431号互聯網出版許可證新出網證(京)字008號 經營性網站備案資訊京公網安備11010802020460號 ©2014中國知網(CNKI)《中國學術期刊(光盤版)》電子雜誌社有限公司 服務熱線：400-810-9888訂卡熱線：800-810-6613 在線諮詢：http://help.cnki.net客服中心：http://service.cnki.net/電子郵件：[email protected]