水中氨氮檢測方法－靛酚比色法 - 台灣實驗室網

含有氨氮及銨離子之水樣於加入次氯酸鹽（Hypochlorite）及酚溶液反應，生成深藍色之靛酚（Indophenol），此溶液之顏色於亞硝醯鐵氰化鈉溶液（Sodium ... 儀器 耗材 廠商 品牌 新聞 搜索技巧 搜索技巧 搜索技巧 搜索技巧 搜索技巧 台灣實驗室網»實驗方法 資料庫首頁 水質檢測 空氣與物理 環境生物 食品檢驗 土壤 廢棄物 飲用水處理藥劑 環境用藥 廢棄物與土壤共通 我的位置台灣實驗室網»實驗方法»水質檢測 水中氨氮檢測方法－靛酚比色法 來源： 時間：2009/7/23下午04:21:00 點擊：12372 水中氨氮檢測方法－靛酚比色法 &nbsp 一、方法概要 &nbsp 　　含有氨氮及銨離子之水樣於加入次氯酸鹽（Hypochlorite）及酚溶液反應，生成深藍色之靛酚（Indophenol），此溶液之顏色於亞硝醯鐵氰化鈉溶液（Sodiumnitroprusside）之催化後會更加強烈。

使用分光光度計於波長640nm處進行比色分析，即可求得水樣中氨氮之濃度。

&nbsp 二、適用範圍 &nbsp 　　本方法適用於飲用水水質、飲用水水源水質、地面水體、地下水、放流水、廢（污）水及海域水質中氨氮之分析。

使用光徑1cm樣品槽時，方法偵測極限約0.01mg/L。

三、干擾 &nbsp （一）樣品中若含有餘氯，會對樣品造成干擾。

（二）利用檸檬酸鹽（Citrate）可將鈣、鎂離子錯合，可除去此類離子在高pH值狀態下產生沉澱所造成的干擾。

（三）濁度會形成干擾，可藉由蒸餾或過濾去除之。

（四）如有硫化氫存在時，可以稀鹽酸酸化樣品使pH值至3，然後再以劇烈曝氣，直至硫化合物臭味不被偵測到。

四、設備及材料 &nbsp （一）分光光度計：在波長640&plusmn1nm下，使用光徑1cm或以上之樣品槽。

（二）蒸餾裝置：準備800至2000mL平底或圓底玻璃燒瓶，連結至一直立式冷凝裝置，接口處以磨砂口銜接，其出口尖端須浸於酸吸收溶液之液面下；使用全硼矽玻璃裝置或以錫（或鋁）質的管子連接組成的冷凝裝置。

（三）加熱裝置：加熱包或加熱板等尺寸適宜之加熱裝置。

（四）分析天平：可精秤至0.1mg。

（五）移液管或經校正之自動移液管。

（六）定量瓶。

（七）電磁攪拌器：磁石需是熱絕緣且外裹鐵氟龍。

（八）pH計。

（九）三角錐瓶或其它適用樣品反應瓶（附蓋或以塑膠或Paraffin膜覆蓋）：50mL。

五、試劑 &nbsp （一）試劑水：不含氨氮之二次蒸餾水或去離子蒸餾水，以其配製試劑、清洗或稀釋樣品，使用前製備，並需時常藉由空白分析來查核試劑水，是否含有氨氮。

（二）硫代硫酸鈉溶液（去氯試劑）：溶解3.5g硫代硫酸鈉（Na2S2O3．5H2O）於試劑水中，再稀釋至1000mL，須每週配製（註1）。

（三）硼酸鹽緩衝溶液：加88mL0.1M氫氧化鈉溶液於500mL0.025M四硼酸鈉溶液（Na2B4O75.0g/L或Na2B4O7．10H2O9.5g/L）以試劑水稀釋至1L。

（四）氫氧化鈉（Sodiumhydroxide）溶液，6M：將240gNaOH溶解於試劑水中，並攪拌待溶解後，稀釋至1000mL。

﹙五﹚氫氧化鈉溶液，10M：取40gNaOH溶解於80mL試劑水中，並攪拌待溶解後，稀釋至100mL。

（六）氫氧化鈉溶液，1M：取4gNaOH溶解於80mL試劑水中，並攪拌待溶解後，稀釋至100mL。

（七）硫酸溶液，0.5M：稀釋25mL濃H2SO4至1L。

（八）硫酸（吸收）溶液，0.02M：稀釋1mL濃H2SO4至1L。

（九）沸石：以分子篩沸石效果較佳，使用前須於清洗蒸餾裝置時一同清洗。

（十）比色分析時所用試劑 1.酚溶液（Phenolsolution）：取11.1mL液態酚（純度≧89﹪）以95﹪（V/V）乙醇（Ethylalcohol）混合至最終體積100mL，每週製備。

註：當操作酚時，須戴手套、護眼裝置；在通風良好環境下可減少曝露於此劇毒揮發性物質之危險。

2.亞硝醯鐵氰化鈉（Sodiumnitroprusside）溶液，0.5﹪（W/V）：溶解0.5g亞硝醯鐵氰化鈉於100mL試劑水。

貯存於棕色瓶，最長一個月。

3.鹼性檸檬酸鹽溶液（Alkalinecitratesolution）：溶200g檸檬酸三鈉鹽（Trisodiumcitrate）和10g氫氧化鈉於試劑水，再稀釋至1L。

4.次氯酸鈉（Sodiumhypochlorite）約5﹪，可購買市售溶液，使用前適當稀釋。

當溶液開封，會慢慢分解。

大約每二個月要更換一次。

5.氧化劑溶液（Oxidizingsolution）：以25mL次氯酸鈉和100mL鹼性檸檬酸鹽溶液混合，使用前配製。

（十一）氨氮儲備溶液（Ammoniumstockstandard）：取3.819gNH4Cl﹙預先於110℃乾燥二小時﹚溶解於試劑水中，並稀釋至1000mL﹙此溶1.00mL＝1.00mgN＝1.22mgNH3﹚。

（十二）氨氮標準中間溶液：取10.0mL氨氮儲備溶液，至1000mL量瓶內，稀釋至刻度﹙此溶液1.00mL＝10.00&ampmug氨氮﹚。

（十三）氨氮標準溶液：取10.0mL氨氮中間溶液，至100mL量瓶內，稀釋至刻度﹙此溶液1.00mL＝1.00&ampmug氨氮﹚。

六、採樣與保存 &nbsp （一）採樣：使用清潔並經試劑水清洗過之塑膠瓶或玻璃瓶。

在取樣前，採樣瓶可用擬採集之水樣洗滌二至三次。

如果樣品中含有餘氯，則採樣時應立即添加適量的硫代硫酸鈉溶液（去氯試劑）處理（添加量請參考註1）。

（二）保存：樣品之運送及保存須在4℃以下暗處冷藏，並於24小時內檢測。

若樣品為含有機性及含氮性物質高的樣品或需保存較長時間之樣品，採樣後應加入適量（勿過量）的濃硫酸，調整pH值至小於2，在此條件下樣品可保存七天。

七、步驟 &nbsp （一）蒸餾：樣品之蒸餾並非必要，若樣品為廢污水、有干擾物出現或需高準確度之飲用水等樣品檢測時，則應執行蒸餾步驟，但如果樣品為經常檢測之相同基質來源水樣，各檢驗室必須曾執行至少一至二批該類樣品之蒸餾與不蒸餾的同步驗證檢測，其結果必須在可接受之範圍（相對差異比小於15﹪，且未蒸餾樣品檢測的添加回收率界於85至115﹪之內），並留有紀錄，以證明或支持爾後該來源樣品可不執行前處理蒸餾，否則皆應執行樣品之前處理蒸餾步驟。

1.設備的清洗準備：取500mL試劑水於燒杯中，加入20mL硼酸鹽緩衝溶液，以6M氫氧化鈉溶液調整pH至9.5後，移入蒸餾燒瓶中，加數粒沸石，加熱蒸餾直至蒸出液無氨氮為止。

將蒸餾裝置的連接裝配移開，保留沸石於蒸餾瓶中，倒出殘留溶液，捨棄之。

直至樣品開始蒸餾前，須避免污染。

2.樣品的準備：於經上述處理之蒸餾瓶中，加入500mL已去氯樣品或適當量樣品以試劑水稀釋至500mL，當氨氮含量低於0.1mg/L時，樣品體積宜使用1000mL（在收集樣品時，應加入等量的硫代硫酸鈉溶液以去除餘氯）。

如果需要，以稀釋的硫酸或氫氧化鈉溶液，調整pH值至7左右。

準備好的樣品，再添加25mL硼酸鹽緩衝溶液，然後以6M氫氧化鈉溶液調整pH值至9.5。

3.樣品蒸餾：以每分鐘6至10mL速率蒸餾，收集氨蒸餾液至500mL定量瓶或其他適用的蒸餾接收容器，上述量瓶內須置放50mL0.02M的硫酸（吸收）溶液；保持蒸出液滴出口在硫酸（吸收）溶液之液面下2公分；收集蒸餾液至少200mL於氨蒸餾液的接收容器內，再將蒸餾裝置的輸送管末端離開吸收溶液面，不再與其接觸，然後繼續蒸餾數分鐘，以洗滌冷凝器及輸送管線至蒸餾液約300mL，再以試劑水稀釋定量至500mL。

﹙二﹚檢量線製備 1.取25.0mL試劑水，於50mL之附蓋三角錐瓶中或其它適用樣品反應瓶，再依次添加入1.0mL酚溶液、1.0mL亞硝醯鐵氰化鈉溶液及2.50mL氧化劑溶液（每次加入各溶液後，均須混合均勻），使樣品呈色。

靜置於室溫（22至27℃）暗處下，至少1小時，此顏色可穩定24小時以上。

以此溶液將分光光度計於波長640nm處歸零。

2.精取適量之氨氮標準溶液（1.0mg/L）於100mL量瓶，由高濃度至低濃度序列稀釋成至少五組不同濃度之檢量線製備用溶液。

如：0.02、0.04、0.06、0.10、0.20mg/L或其他適當之序列濃度（檢量線配製濃度不可大於1.0mg/L）。

3.再取25.0mL上述配製之序列濃度檢量線溶液，於50mL之附蓋三角錐瓶中或其它適用樣品反應瓶，並依七（二）1.的檢測步驟使樣品呈色，製備檢量線。

4.量測在波長640nm之吸光度，以標準溶液濃度（mg/L）為X軸，吸光度為Y軸，繪製一吸光度與氨氮濃度﹙mg/L﹚之檢量線。

﹙三﹚樣品的檢測 1.若採樣時樣品已經加酸保存，且樣品未經蒸餾前處理時，則先取適量樣品，調整其pH值至7以上（注意勿過分稀釋水樣），並過濾樣品（以避免干擾）。

2.取上述25.0mL樣品或經蒸餾前處理之蒸出液（必要時將上述樣品或蒸出液經適當稀釋至25.0mL），於50mL之附蓋三角錐瓶或其它適用樣品反應瓶中。

以七（二）1.的檢測步驟操作，使樣品呈色。

即可由檢量線求得水樣中氨氮之濃度。

八、結果處理 &nbsp 　　由樣品溶液測得之吸光度，代入檢量線可求得溶液中氨氮的濃度（mg/L），再依下式計算樣品中氨氮的濃度。

　　A＝A&amprsquo&timesF 　　A：樣品中氨氮的濃度（mg/L)。

　　A&amprsquo：由檢量線求得樣品溶液中氨氮的濃度（mg/L)。

　　F：稀釋倍數。

九、品質管制 &nbsp （一）檢量線：製備檢量線時，至少應包括五種不同濃度之標準溶液，其線性相關係數（R值）應大於或等於0.995以上。

（二）空白分析：每批次或每十個樣品至少應執行一個空白樣品分析，空白分析值應小於二倍方法偵測極限。

（三）查核樣品分析：每批次或每十個樣品至少應執行一個查核樣品分析。

（四）重複分析：每批次或每十個樣品至少應執行一個重複分析。

（五）添加標準品分析：每批次或每十個樣品至少應執行一個添加已知量標準溶液之樣品分析，若回收率超過85至115﹪管制極限時，必需重做。

十、精密度與準確度 &nbsp 　　單一實驗室針對氨氮－靛酚法，以硫酸銨溶液製備（0.05mg/L）及（0.02mg/L）之參考樣品，並經前處理蒸餾後檢測結果的準確度與精密度見表一。

十一、參考資料 &nbsp AmericanPublicHealthAssociation,AmericanWaterWorksAssociation&ampWaterPollutionControlFederation,StandardMethodsfortheExaminationofWaterandWastewater,20thed.,Method4500-NH3,pp.4-103～4-109,APHA,Washington,D.C.,USA,1998. 　 註1：在500mL水樣中，使用1mL硫代硫酸鈉溶液，可去除1mg/L餘氯。

註2：廢液分類處理原則－本檢驗廢液依一般有機廢液處理。

　 　 表一、氨氮參考樣品經前處理蒸餾後準確度與精密度結果表 配製值 (mg/L) 測&nbsp值 (mg/L) 準確度 (％) 精密度 RSD(％) 0.05 0.0507 104.6&plusmn6.0 5.7 0.05 0.0519 0.05 0.0573 0.05 0.0530 0.05 0.0546 0.05 0.0506 0.05 0.0481 0.02 0.0260 118.1&plusmn26.6 22.5 0.02 0.0213 0.02 0.0226 0.02 0.0176 0.02 0.0320 0.02 0.0277 0.02 0.0193 0.02 0.0290 0.02 0.0170 　 本文取自行政院環保署檢測方法公告事項 中華民國94年5月12日環署檢字第0940035925A號公告 自中華民國94年8月15日起實施 NIEAW448.51B 相關資料 動物細胞的冷凍保存 2017/5/8上午11:44:00 動物用藥品檢驗標準第50條、第137條、 2017/5/8上午11:43:00 DMSO冷凍細胞原理 2017/5/8上午11:42:00 樣品基質對食品農藥殘留例行分析之影響的最 2014/1/28下午01:49:00 食品中黴菌毒素檢驗方法－T-2毒素及H 2009/9/28上午11:02:00 土壤中多氯聯苯篩檢方法－氯離子電極法 2009/8/20下午04:07:00 copyright®TaiwanLab版權所有 要在臺灣實驗室網投放廣告或成為我們的特約贊助商，請聯繫我們