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Necdin基因(NDN) 的母系對偶基因具有基因印痕(gene imprinting)，只有父系的對偶基因能夠被轉錄成mRNA。

雖然Necdin被認為對於神經細胞的分化和成熟 ... 國立成功大學機構典藏:Item987654321/105571 English  |  正體中文  |  简体中文  |  全文筆數/總筆數:107301/144658(74%) 造訪人次:16346157      線上人數:44 RCVersion7.0©PoweredByDSPACE,MIT.EnhancedbyNTULibraryIRteam.ReEnhancedbyNCKULibraryIRteam. 搜尋範圍 全部NCKUR 生物科學與科技學院    生命科學系       --博碩士論文 查詢小技巧：您可在西文檢索詞彙前後加上"雙引號"，以獲取較精準的檢索結果若欲以作者姓名搜尋，建議至進階搜尋限定作者欄位，可獲得較完整資料 進階搜尋 主頁 ‧ 登入 ‧ 上傳 ‧ 說明 ‧ 關於NCKUR ‧ 管理 國立成功大學機構典藏 > 生物科學與科技學院 > 生命科學系 > 博碩士論文 >  Item987654321/105571 資料載入中..... 書目資料匯出 EndnoteRIS格式資料匯出 Bibtex格式資料匯出 引文資訊 請使用永久網址來引用或連結此文件: http://ir.lib.ncku.edu.tw/handle/987654321/105571 題名: 神經細胞分化時Necdin基因甲基化調控之研究 其他題名: DNAMethylationStatusofNecdinGeneduringNeuronalDifferentiation 作者: 蔡宗樺Tsai,Chung-hua 貢獻者: 生命科學系碩博士班曾淑芬Tzeng,Shun-Fen 日期: 2010-03-18 上傳時間: 2011-02-1415:25:06(UTC+8) 摘要: Necdin由325個胺基酸所構成，為一與神經細胞分化有關的蛋白質。

其主要表現在神經細胞或骨骼肌細胞等後分裂時期細胞(postmitoticcells)。

Necdin基因(NDN)的母系對偶基因具有基因印痕(geneimprinting)，只有父系的對偶基因能夠被轉錄成mRNA。

雖然Necdin被認為對於神經細胞的分化和成熟扮演著重要的角色，但是NDN本身是如何被調控的，目前還不是非常了解。

NDN位於人類染色體15q11-q13，此段基因如發生缺失(deletion)，會造成稱做小胖威利症(Prader-WillisyndromePWS)的神經發育不正常遺傳疾病，此疾病也是一典型的與基因印痕有關的疾病。

基因印痕是藉由甲基化基因上CpG雙核苷酸上的胞嘧啶，使得基因表現被抑制的機制(genesilencing)。

亞硫酸鹽轉換(bisulfiteconversion)是一種能夠讓胞嘧啶(C)轉換成尿嘧啶(U)的方法，然而被甲基的胞嘧啶不會進行轉換，因此可以區分該胞嘧啶是否被甲基化。

利用這個方法，我分析了老鼠ndnCpG-rich區域的甲基化狀態。

DNA樣品取自E145、ndn突變老鼠大腦皮層的神經幹細胞，其ndn父系對偶基因插入了neomycin耐受基因(neomycin-resistantgenecassette)，因此定序時可以利用Necdin和neomycin專一的引子區別父系和母系對偶基因。

我分析了23個介於-299到+93(ATG轉譯起點為+1)的CpG位置(CpGsite)，而這23個CpG位置位於-264到+470的CpG島(CpGisland)。

同時，這23個CpG位置包含了轉錄和轉譯起點。

我預期大部分母系ndn對偶基因的CpG位置會被甲基化。

然而，定序結果顯示其未分化與已分化的大腦皮層神經幹細胞，CpG位置甲基化程度分別約為60%和53%。

父系ndn對偶基因方面，未分化與已分化的甲基化程度分別為62%與40%。

這顯示了不論是父系或是母系ndn對偶基因，在神經細胞分化時都會受到甲基化機制的調控，而且父系對偶基因受到的影響比母系還大。

此外，有些CpG位置在神經細胞分化時，其甲基化程度變動很大。

這些結果顯示在神經分化時，ndn的表現可能與某些特定的CpG位置甲基化有關。

NECDINisaneuraldifferentiation-associatedproteincomposedof325aminoacidsNECDINispredominantlyexpressedinpostmitoticcellssuchasneuronandskeletalmuscleTheNECDINgene(NDN)ismaternallyimprintedandonlythepaternalalleleistranscribedintomRNAAlthoughNECDINisthoughttoplayanimportantroleinneuronaldifferentiationandmaturationtheregulatorymechanismofNDNexpressionisnotwellunderstoodNDNislocatedinhumanchromosome15q11-q13whosedeletioncausestheneurodevelopmentaldisorderPrader-Willisyndrome(PWS)aclassicgenomicimprinting-associateddisorderGenomicimprintingisagenesilencingprocessthroughcytosine-specificmethylationatCpGsitesIanalyzedthemethylationstatusofCpG-richregionofmousendnusingbisulfiteconversionmethodbasedontheprinciplethatmethylatedcytosineisprotectedfromconversiontouracilThereforethedifferencebetweenmethylatedandunmethylatedcytosinecanbedetectedbyDNAsequenceanalysisGenomicDNAsampleswerepreparedfromneuralstemcells(NSCs)oftheneocortexofE145ndn-mutatedmiceThepaternalalleleofndn-mutatedmiceismutatedbyinsertionwithaneomycin-resistantgenecassetteUsingprimersthatspecificallyrecognizeNecdinandneomycin-resistantgenesequencesthedifferencebetweenpaternalandmaternalNecdinallelescanbedistinguishedAmongCpGislandsfrom-264to+470(ATGtranslationstartsite=+1)23CpGsitesfrom-229to+93inwhichthetranscriptionandtranslationstartsitesareincludedwereanalyzedWefoundthatDNAsequencedataindicatedthat60%and53%ofCpGsitesweremethylatedinundifferentiatedanddifferentiatedcorticalNSCsrespectivelyIncontrast62%and40%oftheCpGsitesinthepaternalalleleweremethylatedinundifferentiatedanddifferentiatedNSCsrespectivelyTheresultsalsoindicatedthatthemethylationstatusisregulatedinboththepaternalandmaternalallelesduringneuraldifferentiationofNSCsbutthemethylationstatusofthepaternalalleleismoreaffectedthanthatofthematernalalleleFurthermoresomespecificCpGsitesinthepaternalandmaternalallelesareprofoundlyaffectedbyneuronaldifferentiationTheseresultssuggestthatndnexpressionisregulatedthroughmethylationofspecificCpGsitesduringneuronaldifferentiation 顯示於類別:[生命科學系]博碩士論文 文件中的檔案: 檔案 描述 大小格式瀏覽次數 index.html0KbHTML570檢視/開啟 在NCKUR中所有的資料項目都受到原著作權保護. RelatedItemsinTAIR DSpaceSoftware Copyright © 2002-2004  MIT &  Hewlett-Packard /  Enhancedby  NTULibraryIRteam Copyright ©    /  ReEnhancedby  NCKULibraryIRteam  - 回饋