怎麼測定唾液澱粉酶的最適ph - 康途健康百科
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唾液澱粉酶(pancreaticamylase)是由唾液腺分泌的一種水解酶,而澱粉經唾液中澱粉酶的水解,生成糊精和麥芽糖。
而知道唾液澱粉酶的最適ph對於自身有 ...
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怎麼測定唾液澱粉酶的最適ph
2015-12-27
唾液澱粉酶(pancreaticamylase)是由唾液腺分泌的一種水解酶,
而澱粉經唾液中澱粉酶的水解,
生成糊精和麥芽糖。
而知道唾液澱粉酶的最適ph對於自身有好處,
那麼唾液澱粉酶的最適ph是多少呢,
又應該怎麼測定唾液澱粉酶的最適ph?
在底物過量的條件下,
相同時間內,
在溫度、酶濃度相同的條件下,
接近最適pH的反應體系中消耗澱粉的量最大,
剩餘澱粉與過量碘液生成的顏色越淺,
吸光度越小,
利用分光光度計測出各管的吸光度後,
取處於升高與降低趨勢之間的較小吸光度範圍對應的pH值即為唾液澱粉酶的最適pH。
一、材料與方法儀器:吸量管(5mL,
1mL),
試管,
試管架,
小燒杯,
722型分光光度計,
恒溫箱,
吸耳球試劑:0.01mol/L碘液,
0.2mol/L磷酸氫二鈉,
0.2mol/L磷酸二氫鈉,
澱粉溶液,
唾液,
蒸餾水
二、方法:相同時間內,
在溫度、酶濃度相同、pH不同的條件下,
酶的活度不同,
水解的澱粉量不同,
剩餘的澱粉與過量碘液生成的顏色不同,
通過在660nm測量吸光度,
得出酶的最適pH範圍。
操作步驟:
1、唾液的獲取:蒸餾水漱口後在口中含蒸餾水,
適宜時間後將蒸餾水連同唾液一同放置於事先準備好的容器中即可,
在實驗過程中應注意酶的失活,
為了防止此現象發生應將此液體置於冰水中冷卻。
2、不同pH緩衝液配製:根據下表配置各個pH值的緩衝溶液各10ml
3、澱粉用量的確定(為了更好觀察顏色變化,
可以加入適量蒸餾水使總體積相同。
混勻,
觀察現象,
並選擇顏色變化適中一支,
記錄其用量。
)
4、酶液稀釋倍數確定(為了更好觀察顏色變化,
可以加入適量蒸餾水使總體積相同,
混勻,
觀察現象,
並選擇適中一支,
記錄其稀釋倍數。
)
5、最適pH確定(蒸餾水調零,
測定660nm處吸光度A,
最後以A為縱坐標,
pH為橫坐標作圖,
取曲線最低點對應的pH值,
即為唾液澱粉酶的最適pH值。
)
從上述的實驗中或許可以得出6.8為曲線最低點對應的pH值,
即為唾液澱粉酶的最適pH值。
但是需要注意的是澱粉酶的測定結果受方法的影響較大,
怎麼測定唾液澱粉酶的最適ph?不同方法參考值亦有所不同,
臨床所用方法也較多,
因此必須瞭解所用測定方法和其參考值,
才能作出正確的診斷。
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